Các mẫu máu chứa DNA phong phú, bao gồm DNA ty thể, DNA bộ gen, DNA tuần hoàn (hầu hết được giải phóng vào máu sau khi tế bào khối u chết theo chương trình) trong tế bào bạch cầu, cũng như DNA của virus hoặc vi khuẩn ký sinh. Những DNA này là thông số quan trọng trong xét nghiệm hoặc chẩn đoán lâm sàng, đồng thời là tài liệu có giá trị cho nghiên cứu y học. Có ba vấn đề chính khi trích xuất DNA từ mẫu máu:

1. Mẫu có khả năng lây nhiễm cao, gây hại lớn cho người vận hành và môi trường.

2. Nguồn DNA rất phức tạp và một phần axit nucleic, chẳng hạn như DNA virus hoặc DNA tự do, có thể bị mất trong quá trình hoạt động, dẫn đến lỗi phát hiện ở cuối dòng;

3. Mẫu máu chứa một lượng lớn tạp chất và các yếu tố ức chế.

Hiện nay có nhiều phương pháp để tách DNA từ mẫu máu toàn phần, chẳng hạn như chiết xuất phenol chloroform, phương pháp muối, v.v. Tuy nhiên, các phương pháp này yêu cầu xử lý trước mẫu máu, loại bỏ hồng cầu và phân lập bạch cầu trong máu. bước đầu tiên. Do yêu cầu không thể làm bất hoạt hoặc tiêu diệt mầm bệnh trong quá trình loại bỏ hồng cầu, chất lỏng thải (lysate hồng cầu) và vật tư tiêu hao có thể bị nhiễm mầm bệnh và lây nhiễm, gây nguy hiểm cho toàn bộ môi trường phòng thí nghiệm và người vận hành. . Ngoài ra, trong quá trình loại bỏ hồng cầu, thông tin axit nucleic hữu ích như virus, vi sinh vật hoặc DNA lưu hành cũng bị mất, dẫn đến thất bại trong thí nghiệm hoặc phát hiện.

Sản phẩm này cung cấp các phương pháp nhanh chóng và dễ dàng để tinh chế DNA tổng số cho phương pháp PCR và Southern Blotting đáng tin cậy. Tổng số DNA (ví dụ: bộ gen, virus, ty thể) có thể được tinh chế từ mô và tế bào nuôi cấy.

Thông số kỹ thuật

Tính năng	Thông số kỹ thuật
Tính năng	Phân lập DNA tổng số từ 2ml máu và 200mg mô bằng cột Midi
Ứng dụng	PCR, southern bolt và phát hiện virus, etc
Phương pháp tinh sạch	Cột quay mini
Công nghệ tinh sạch	Công nghệ Silica
Phương pháp xử lý	Thủ công (ly tâm hoặc chân không)
Loại mẫu	Mô, tế bào, máu, nước bọt, dịch , vết máu, tinh dịch và các mẫu lâm sàng khác
Lượng mẫu	0.2-2 ml
Thể tích rửa giải	≥300μl
Thời gian mỗi lần	≤80 phút
Thể tích chất lỏng trên	4ml
Hiệu suất liên kết cột	1mg

 

Nguyên tắc

Sản phẩm này dựa trên quá trình tinh chế cột silica. Mẫu được ly giải và phân hủy bằng lysate và protease, DNA được giải phóng vào lysate. Chuyển sang cột hấp phụ. Axit nucleic được hấp phụ trên màng, trong khi protein không được hấp phụ và được loại bỏ bằng quá trình lọc. Sau khi rửa protein và các tạp chất khác, axit nucleic cuối cùng được rửa giải bằng dung dịch đệm ít muối (10 mm Tris, pH9,0, 0,5 mm EDTA).

Thuận lợi

• DNA chất lượng cao – đáp ứng nhiều ứng dụng tiếp theo, bao gồm PCR, qPCR, tiêu hóa enzyme, lai tạo, v.v
• Nhanh chóng – không cần tách bạch cầu, chiết xuất hữu cơ hoặc kết tủa ethanol
• Đơn giản – tất cả các axit nucleic có thể thu được bằng cách tiêu hóa trực tiếp
• Khả năng ứng dụng rộng rãi – xử lý nhiều loại mẫu chất lỏng

KIT Content

Contents	D311302	D311303
Purification Times	20	100
HiPure gDNA Midi Columns	20	100
15ml Collection Tubes	40	200
Buffer ATL	50 ml	250 ml
Buffer AL	50 ml	250 ml
Buffer GW1*	22 ml	110 ml
Buffer GW2*	12 ml	50 ml
RNase A	20 mg	90 mg
Proteinase K	100 mg	440 mg
Protease Dissolve Buffer	10 ml	30 ml
Buffer AE	20 ml	120 ml

Lưu trữ và ổn định
Proteinase K, RNase A nên được bảo quản ở nhiệt độ 2-8°C khi đến nơi. Tuy nhiên, việc bảo quản ngắn hạn (tối đa 12 tuần) ở nhiệt độ phòng (15-25°C) không ảnh hưởng đến hiệu quả của chúng. Các thành phần còn lại của bộ kit có thể được bảo quản ở nhiệt độ phòng (15-25°C) và ổn định trong ít nhất 18 tháng trong những điều kiện này.